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公司动态
显微镜制片技术之石蜡切片
发布时间:2011-09-17        浏览次数:571        返回列表
显微镜制片技术之石蜡切片
    石蜡切片法是显微镜技术上重要、常用的一种方法。它是把材料封埋在石蜡里面,用旋转切片机可以切出很薄的切片。凡是精细的组织结构,大都用石蜡切片。一般的切片厚度要求在4--65m。而石蜡切片不但可以达到这个要求,甚至可以切得更薄到25m以至I5m。这一点是冰冻切片和火棉胶切片难以获得的结果。另外,石蜡切片还便于制作大批或是连续的切片,以石蜡包埋的组织块还便于长期保存。然后方便用奥林巴斯显微镜进行观察,所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中普通常用的一种方法。
    石蜡切片制作全过程包括:取材、固定、洗涤、脱水、透明、透蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、胶封等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,
但标本可以长期保存使用,为性显微玻片标本。由于全过程操作比较复杂,所用试剂较多,耗时较长,特分为4部分介绍。实验十五主要介绍石蜡切片制作的取材、固定、洗涤及脱水操
作。
    取材是根据要求选择合适的动植物材料,例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖,细胞分裂快又便于切取。材料必须新鲜,搁置时间过久则蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋
生,不能反映组织活体时的形态结构。
    固定就是借助化学药品的作用,使细胞的原生质凝固、终止细胞的代谢过程、防止细胞自溶或组织变化,尽可能保持其活体时的结构。固定能使组织硬化,有利于切片的进行,而
且也有媒浸作用,有利于组织着色。良好的固定剂,应具备的特点是穿透力强,使细胞立刻致死,原生质全部凝固;不发生任何变形,增强折光率,并且不妨碍染色。固定液的种类很多,
根据配制成分可划分为简单固定液和混合固定液。简单固定液是以一种化学药品配制的固定液。常用的简单固定液有:酒精、福尔马林、醋酸、升汞、饿酸(四氧化饿)、重铬酸钾及苦味酸
等。
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